کینسر کی قسم اور درجہ عام طور پر اس وقت واضح ہوتا ہے جب خلیات کو معمول کی کارروائی اور داغدار ہونے کے بعد خوردبین کے نیچے دیکھا جاتا ہے، لیکن ایسا ہمیشہ نہیں ہوتا ہے۔ بعض اوقات پیتھالوجسٹ کو تشخیص کرنے کے لیے دوسرے طریقہ کار کو استعمال کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔

ہسٹو کیمیکل داغ

یہ ٹیسٹ مختلف قسم کے کیمیائی رنگوں کو استعمال کرتے ہیں جو کینسر کے خلیوں میں پائے جانے والے مخصوص کیمیکلز کی طرف کھینچے جاتے ہیں۔ مثال کے طور پر mucicarmine کا داغ بلغم کی طرف کھینچا جاتا ہے۔ ایک خوردبین کے نیچے، اس رنگ کے سامنے آنے والے سیل کے اندر بلغم کی بوندیں گلابی سرخ دکھائی دیں گی۔ اگر کسی پیتھالوجسٹ کو پھیپھڑوں کے نمونے میں ایڈینو کارسینوما (ایک غدود کی قسم کا کینسر) کا شبہ ہو تو یہ داغ مدد کر سکتا ہے۔ چونکہ اڈینو کارسینوماس بلغم پیدا کر سکتا ہے، اس لیے پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیوں میں گلابی سرخ دھبوں کا پتہ لگانا اس بات کی نشاندہی کرے گا کہ پیتھالوجسٹ کے لیے تشخیص ایڈینو کارسینوما ہے۔

مختلف قسم کے ٹیومر کو چھانٹنے کے علاوہ، بافتوں میں بیکٹریا اور فنگس جیسے مائکروجنزم (جراثیم) کی شناخت کے لیے لیب میں دیگر قسم کے مخصوص داغ لگائے جاتے ہیں۔ یہ بہت اہم ہے کیونکہ کینسر کے مریضوں کو ان کے علاج کے نتیجے میں یا خود بیماری کے نتیجے میں انفیکشن ہو سکتا ہے۔ یہ کینسر کی تشخیص میں بھی بہت اہم ہے کیونکہ کچھ متعدی عوارض گانٹھیں بناتے ہیں جنہیں کینسر سمجھا جا سکتا ہے یہاں تک کہ ہسٹو کیمیکل داغ یہ ظاہر کرتے ہیں کہ مریض کینسر کی بجائے انفیکشن میں مبتلا ہے۔

امیونو ہسٹو کیمیکل داغ

امیونو ہسٹو کیمیکل (IHC) یا immunoperoxidase کے داغ مخصوص ٹیسٹوں کی ایک اور کلاس ہیں جو انتہائی قیمتی ہو سکتی ہیں۔ اس حکمت عملی کے پیچھے بنیادی خیال یہ ہے کہ ایک مدافعتی پروٹین جسے اینٹی باڈی کہا جاتا ہے اپنے آپ کو مخصوص مالیکیولز کے ساتھ جکڑ لے گا جسے اینٹیجنز کہتے ہیں۔ اینٹی باڈیز ان اینٹیجنز کی شناخت اور ان پر عمل کرتی ہیں جو ان کے لیے مخصوص ہیں۔ عام خلیات اور مہلک خلیوں میں سے ہر ایک کے اپنے اینٹیجن ہوتے ہیں۔ اگر کسی خلیے میں ایک مخصوص اینٹیجن ہے تو، اینٹی باڈی جو اینٹیجن سے میل کھاتا ہے اس کی طرف کھینچا جائے گا۔ یہ دیکھنے کے لیے کہ آیا اینٹی باڈیز خلیات کی طرف کھینچی گئی ہیں، ایسے کیمیکلز دیے جاتے ہیں جن کی وجہ سے خلیات کا رنگ صرف اس وقت تبدیل ہوتا ہے جب ایک مخصوص اینٹی باڈی (اور اس طرح اینٹیجن) موجود ہو۔

ہمارے جسم عام طور پر اینٹی باڈیز بناتے ہیں جو جراثیم پر اینٹی جینز کو پہچانتے ہیں اور ہمیں انفیکشن سے بچانے میں مدد کرتے ہیں۔ IHC داغوں میں استعمال ہونے والی اینٹی باڈیز مختلف ہیں۔ وہ لیبارٹری میں ایسے اینٹیجنز کو پہچاننے کے لیے بنائے گئے ہیں جو کینسر اور دیگر بیماریوں سے جڑے ہوئے ہیں۔

IHC کے داغ مخصوص خرابیوں کی تشخیص میں کافی مددگار ہیں۔ لمف نوڈ کی معمول کے مطابق پروسیس شدہ بایپسی، مثال کے طور پر، ایسے خلیات ہوسکتے ہیں جو واضح طور پر کینسر کی طرح ظاہر ہوتے ہیں، لیکن پیتھالوجسٹ یہ بتانے کے قابل نہیں ہوسکتا ہے کہ کینسر لمف نوڈ سے شروع ہوا یا جسم کے کسی اور حصے سے لمف نوڈس میں پھیل گیا۔ lymphoma کی اگر کینسر لمف نوڈ میں شروع ہوا تو اس کی تشخیص ہوگی۔ یہ میٹاسٹیٹک کینسر ہو سکتا ہے اگر کینسر جسم کے کسی اور مقام سے شروع ہو اور لمف نوڈ میں پھیل جائے۔ یہ فرق اہم ہے کیونکہ علاج کے اختیارات کینسر کی قسم کے لحاظ سے مختلف ہوتے ہیں (نیز کچھ دیگر عوامل بھی)۔

آئی ایچ سی ٹیسٹوں کے لیے سیکڑوں اینٹی باڈیز استعمال ہوتی ہیں۔ کچھ کافی مخصوص ہیں، مطلب یہ ہے کہ وہ صرف ایک قسم کے کینسر کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتے ہیں۔ دوسرے کینسر کی چند اقسام کے ساتھ رد عمل ظاہر کر سکتے ہیں، لہذا یہ فیصلہ کرنے کے لیے کئی اینٹی باڈیز کی جانچ کی جا سکتی ہے کہ یہ کس قسم کا کینسر ہے۔ بائیوپسی کے نمونے پر کارروائی کے بعد کینسر کی ظاہری شکل کے ساتھ ان نتائج کو دیکھ کر، اس کے مقام، اور مریض کے بارے میں دیگر معلومات (عمر، جنس وغیرہ)، اکثر کینسر کی درجہ بندی اس طرح ممکن ہے جس سے بہترین علاج کے انتخاب میں مدد مل سکے۔ .

IHC داغ سب سے زیادہ عام طور پر خلیوں کی درجہ بندی کرنے کے لیے استعمال کیے جاتے ہیں، تاہم، وہ کینسر کے خلیوں کا پتہ لگانے یا شناخت کرنے کے لیے بھی استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ جب کہ کینسر کے خلیات کی کافی تعداد قریبی لمف نوڈ میں منتقل ہو چکی ہے، پیتھالوجسٹ ان خلیوں کو روایتی داغوں کا استعمال کرتے ہوئے آسانی سے شناخت کر سکتا ہے جب خوردبین کے نیچے لمف ٹشو کو دیکھتے ہیں۔ تاہم، اگر نوڈ میں صرف چند کینسر کے خلیات ہوں، تو عام داغوں کا استعمال کرتے ہوئے خلیات میں فرق کرنا مشکل ہو سکتا ہے۔ IHC کے داغ اس صورت حال میں مدد کر سکتے ہیں۔ ایک بار جب پیتھالوجسٹ نے جانچ کی جانے والی خرابی کی قسم کا تعین کر لیا، تو وہ ایک یا زیادہ اینٹی باڈیز کا انتخاب کر سکتا ہے جو ان خلیوں کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتی ہیں۔ مزید کیمیکلز شامل کیے جاتے ہیں تاکہ کینسر کے خلیے رنگ بدلیں اور اپنے ارد گرد کے عام خلیات سے واضح طور پر الگ ہوجائیں۔ IHC کے داغ عام طور پر لمف نوڈ ڈسیکشنز سے ٹشو کو دیکھنے کے لیے استعمال نہیں کیے جاتے ہیں (جو نوڈس کی ایک بڑی تعداد کو ہٹاتے ہیں)، لیکن وہ بعض اوقات سینٹینیل لمف نوڈ بایپسیوں میں استعمال ہوتے ہیں۔

ان داغوں کا ایک اور خصوصی استعمال ان لمف نوڈس میں فرق کرنے میں مدد کرنا ہے جن میں لیمفوما ہوتا ہے جو عام سفید خون کے خلیوں کی بڑھتی ہوئی تعداد سے سوجن ہوتے ہیں (عام طور پر انفیکشن کے ردعمل کے طور پر)۔ خون کے سفید خلیات کی سطح پر بعض اینٹیجنز موجود ہوتے ہیں جنہیں کہتے ہیں۔ لففیکیٹس. سومی (غیر کینسر والے) لمف نوڈ ٹشو میں بہت سے مختلف قسم کے لیمفوسائٹس ہوتے ہیں جن کی سطح پر مختلف قسم کے اینٹیجن ہوتے ہیں۔ اس کے برعکس، لیمفوما جیسے کینسر ایک ہی غیر معمولی خلیے سے شروع ہوتے ہیں، اس لیے اس خلیے سے بڑھنے والے کینسر کے خلیے عام طور پر پہلے غیر معمولی خلیے کی کیمیائی خصوصیات کا اشتراک کرتے ہیں۔ یہ خاص طور پر لیمفوما کی تشخیص میں مفید ہے۔ اگر لمف نوڈ بایپسی میں زیادہ تر خلیوں کی سطح پر ایک جیسے اینٹیجنز ہوتے ہیں، تو یہ نتیجہ تشخیص کی حمایت کرتا ہے۔ lymphoma.

کچھ IHC داغ کینسر کے خلیوں میں مخصوص مادوں کو پہچاننے میں مدد کر سکتے ہیں جو مریضوں کی تشخیص پر اثر انداز ہوتے ہیں اور/یا ان کو بعض دوائیوں سے فائدہ ہونے کا امکان ہے۔ مثال کے طور پر، IHC کو چھاتی کے کینسر کے خلیات پر ایسٹروجن ریسیپٹرز کی جانچ کرنے کے لیے معمول کے مطابق استعمال کیا جاتا ہے۔ جن مریضوں کے خلیوں میں یہ رسیپٹرز ہوتے ہیں ان کے ہارمون تھراپی ادویات سے فائدہ اٹھانے کا امکان ہوتا ہے، جو ایسٹروجن کی پیداوار یا اثرات کو روکتی ہیں۔ IHC اس بات کا تعین کرنے میں بھی مدد کر سکتا ہے کہ چھاتی کے کینسر میں مبتلا خواتین کو ایسی دوائیوں سے فائدہ پہنچنے کا امکان ہے جو HER2 پروٹین کی غیر معمولی اعلی سطح کے بڑھنے والے اثرات کو روکتی ہیں۔

برقی مائکروسکوپی

عام طبی لیب خوردبین نمونوں کو دیکھنے کے لیے عام روشنی کی شہتیر کا استعمال کرتی ہے۔ ایک بڑا، بہت زیادہ پیچیدہ آلہ جسے an کہتے ہیں۔ الیکٹران خوردبین الیکٹران کے شہتیر استعمال کرتا ہے۔ الیکٹران خوردبین کی میگنفائنگ پاور ایک عام لائٹ مائکروسکوپ سے تقریباً 1,000 گنا زیادہ ہے۔ یہ فیصلہ کرنے کے لیے کہ سیل کینسر ہے یا نہیں اس میں اضافہ کی اس ڈگری کی شاذ و نادر ہی ضرورت ہے۔ لیکن یہ بعض اوقات کینسر کے خلیوں کی ساخت کی بہت چھوٹی تفصیلات تلاش کرنے میں مدد کرتا ہے جو کینسر کی صحیح قسم کا سراغ فراہم کرتا ہے۔

ایک معیاری ہلکی خوردبین کے تحت، میلانوما کے بعض کیسز، ایک انتہائی مہلک جلد کا کینسر، دوسرے کینسر ظاہر ہو سکتے ہیں۔ زیادہ تر وقت، IHC کے داغ ان میلانوما کی شناخت کر سکتے ہیں۔ اگر اس طرح کے ٹیسٹ کچھ ظاہر نہیں کرتے ہیں تو، ایک الیکٹران مائکروسکوپ کا استعمال میلانوما خلیوں کے اندر میلانوسومز نامی خوردبین ڈھانچے کو دیکھنے کے لیے کیا جا سکتا ہے۔ اس سے کینسر کی قسم کا تعین کرنے اور علاج کے بہترین آپشن کا تعین کرنے میں مدد ملتی ہے۔

بہاؤ cytometry

فلو سائٹوومیٹری کا استعمال اکثر بون میرو، لمف نوڈس اور خون کے نمونوں سے خلیوں کی جانچ کے لیے کیا جاتا ہے۔ یہ معلوم کرنے میں بالکل درست ہے کہ کسی شخص کو لیوکیمیا یا لیمفوما کس قسم کا ہوتا ہے۔ یہ لمف نوڈس میں غیر کینسر کی بیماریوں سے لیمفوما بتانے میں بھی مدد کرتا ہے۔

بایپسی، سائٹولوجی نمونہ، یا خون کے نمونے سے خلیوں کے نمونے کا علاج خصوصی اینٹی باڈیز سے کیا جاتا ہے۔ ہر اینٹی باڈی صرف مخصوص قسم کے خلیوں سے چپک جاتی ہے جن میں اینٹی جینز ہوتے ہیں جو اس کے ساتھ فٹ ہوتے ہیں۔ اس کے بعد خلیات لیزر بیم کے سامنے سے گزر جاتے ہیں۔ اگر خلیات میں اب وہ اینٹی باڈیز ہیں، تو لیزر انہیں روشنی دے گا جس کے بعد کمپیوٹر کے ذریعے پیمائش اور تجزیہ کیا جائے گا۔

لیوکیمیا یا لیمفوما کے مشتبہ کیسوں کا بہاؤ سائٹومیٹری کے ذریعے تجزیہ کرنے میں وہی اصول استعمال کیے گئے ہیں جن کی وضاحت امیونو ہسٹو کیمسٹری کے سیکشن میں کی گئی ہے:

• تلاش کر رہا ہے سب سے زیادہ خلیات کی سطح پر ایک ہی مادہ نمونے سے پتہ چلتا ہے کہ وہ ایک ہی غیر معمولی خلیے سے آئے ہیں اور ان کے کینسر ہونے کا امکان ہے۔
• متعدد تلاش کرنا مختلف قسم کے اینٹیجنز کے ساتھ سیل کی مختلف اقسام اس کا مطلب ہے کہ نمونے میں لیوکیمیا یا لیمفوما ہونے کا امکان کم ہے۔

کینسر کے خلیوں میں ڈی این اے کی مقدار کی پیمائش کرنے کے لیے فلو سائٹومیٹری بھی استعمال کی جا سکتی ہے (جسے کہتے ہیں۔ چالاکی)۔ پروٹین اینٹیجنز کا پتہ لگانے کے لیے اینٹی باڈیز کا استعمال کرنے کے بجائے، خلیوں کا علاج خصوصی رنگوں سے کیا جا سکتا ہے جو ڈی این اے کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتے ہیں۔

• اگر ڈی این اے کی ایک عام مقدار ہے تو، خلیات کو کہا جاتا ہے ڈپلومیٹ.
• اگر رقم غیر معمولی ہے تو، خلیات کو بیان کیا جاتا ہے aneuploid. زیادہ تر (لیکن تمام نہیں) اعضاء کے اینیوپلائیڈ کینسر ڈپلائیڈ کینسر سے زیادہ تیزی سے بڑھتے اور پھیلتے ہیں۔

فلو سائٹومیٹری کا ایک اور استعمال ایس فیز فریکشن کی پیمائش کرنا ہے، جو کہ نمونے میں خلیات کا فیصد ہے جو سیل ڈویژن کے ایک خاص مرحلے میں ہیں جسے کہتے ہیں۔ ترکیب or ایس مرحلہ. جتنے زیادہ خلیے S-فیز میں ہوتے ہیں، اتنی ہی تیزی سے ٹشو بڑھتا ہے اور کینسر کے زیادہ جارحانہ ہونے کا امکان ہوتا ہے۔

تصویری سائٹومیٹری

بہاؤ سائٹومیٹری کی طرح، یہ ٹیسٹ رنگوں کا استعمال کرتا ہے جو ڈی این اے کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتا ہے۔ لیکن مائع کی ایک ندی میں خلیوں کو معطل کرنے اور لیزر کے ساتھ ان کا تجزیہ کرنے کے بجائے، امیج سائٹومیٹری ایک مائکروسکوپ سلائیڈ پر خلیات میں ڈی این اے کی مقدار کی پیمائش کرنے کے لیے ڈیجیٹل کیمرے اور ایک کمپیوٹر کا استعمال کرتی ہے۔ بہاؤ سائٹوومیٹری کی طرح، امیج سائٹومیٹری بھی کینسر کے خلیات کی چال کا تعین کر سکتی ہے۔

جینیاتی ٹیسٹ

سائٹوجنیٹکس

عام انسانی خلیوں میں 46 کروموسوم ہوتے ہیں (ڈی این اے اور پروٹین کے ٹکڑے جو سیل کی نشوونما اور کام کو کنٹرول کرتے ہیں)۔ کینسر کی کچھ اقسام میں ایک یا زیادہ غیر معمولی کروموسوم ہوتے ہیں۔ غیر معمولی کروموسوم کو پہچاننا کینسر کی ان اقسام کی شناخت میں مدد کرتا ہے۔ یہ خاص طور پر کچھ لیمفوماس، لیوکیمیا اور سارکوما کی تشخیص میں مفید ہے۔ یہاں تک کہ جب کینسر کی قسم معلوم ہو، سائٹوجنیٹک ٹیسٹ مریضوں کے نقطہ نظر کی پیش گوئی کرنے میں مدد کر سکتے ہیں۔ بعض اوقات ٹیسٹوں سے یہ اندازہ لگانے میں بھی مدد مل سکتی ہے کہ کینسر کی کونسی کیموتھریپی دوائیوں کا امکان ہے۔

کینسر کے خلیوں میں کروموسوم کی کئی قسم کی تبدیلیاں پائی جا سکتی ہیں:

• A نقل مکانی یعنی ایک کروموسوم کا کچھ حصہ ٹوٹ چکا ہے اور اب دوسرے کروموسوم پر واقع ہے۔
• An الٹا اس کا مطلب ہے کہ کروموسوم کا حصہ الٹا ہے (اب الٹا ترتیب میں) لیکن پھر بھی صحیح کروموسوم سے منسلک ہے۔
• A حذف کرنا یہ بتاتا ہے کہ کروموسوم کا کچھ حصہ کھو گیا ہے۔
• A نقل و حرکت ایسا ہوتا ہے جب کروموسوم کا کچھ حصہ نقل کیا گیا ہو، اور اس کی بہت سی کاپیاں سیل میں پائی جاتی ہیں۔

بعض اوقات، کینسر کے خلیات میں ایک پورا کروموسوم حاصل یا کھو سکتا ہے۔

سائٹوجینیٹک ٹیسٹنگ کے لیے، کینسر کے خلیے تقریباً 2 ہفتوں تک لیبارٹری کے برتنوں میں اگائے جاتے ہیں اس سے پہلے کہ ان کے کروموسوم کو خوردبین کے نیچے دیکھا جا سکے۔ اس کی وجہ سے، نتائج حاصل کرنے میں عام طور پر تقریباً 3 ہفتے لگتے ہیں۔

سیٹو ہائبرڈائزیشن میں فلوروسینٹ

FISH، یا fluorescent in situ hybridization، cytogenetic testing کی طرح ہے۔ یہ معمول کے سائٹوجنیٹک ٹیسٹوں میں خوردبین کے نیچے نظر آنے والے کروموسومل تبدیلیوں کی اکثریت کا پتہ لگا سکتا ہے۔ یہ ان تبدیلیوں کا بھی پتہ لگا سکتا ہے جو روایتی سائٹوجنیٹک ٹیسٹنگ کے ذریعے بہت چھوٹی ہیں۔

FISH فلوروسینٹ رنگوں کا استعمال کرتی ہے جو DNA کے ٹکڑوں سے منسلک ہوتے ہیں جو صرف کروموسوم کے مخصوص حصوں سے جڑتے ہیں۔ FISH کروموسوم کی تبدیلیوں کا پتہ لگا سکتی ہے جیسے کہ ٹرانسلوکیشن، جو لیوکیمیا کی مخصوص اقسام کی درجہ بندی کرنے میں مفید ہیں۔

مخصوص کروموسوم تبدیلیوں کا پتہ لگانا اس بات کا تعین کرنے میں بھی اہم ہے کہ آیا کچھ مخصوص دوائیں کینسر کی کچھ اقسام کے مریضوں کی مدد کر سکتی ہیں۔ مثال کے طور پر، جب بہت زیادہ کاپیاں ہوں تو FISH دکھا سکتا ہے (کہا جاتا ہے۔ پروردنHER2 جین کا، جو ڈاکٹروں کو چھاتی کے کینسر میں مبتلا کچھ خواتین کے لیے بہترین علاج کا انتخاب کرنے میں مدد کر سکتا ہے۔

معیاری cytogenetic ٹیسٹوں کے برعکس، یہ ضروری نہیں ہے کہ FISH کے لیے لیبارٹری ڈشز میں خلیات کو بڑھایا جائے۔ اس کا مطلب ہے کہ FISH کے نتائج بہت جلد دستیاب ہو جاتے ہیں، عام طور پر چند دنوں میں۔

مالیکیولر جینیاتی ٹیسٹ

ڈی این اے اور آر این اے کے دیگر ٹیسٹوں کا استعمال سائٹوجینیٹک ٹیسٹوں کے ذریعے پائے جانے والے زیادہ تر ٹرانسلوکیشنز کو تلاش کرنے کے لیے کیا جا سکتا ہے۔ وہ کروموزوم کے کچھ حصوں پر مشتمل کچھ نقلیں بھی تلاش کر سکتے ہیں جن کو معمول کی سائٹوجنیٹک جانچ کے ساتھ خوردبین کے نیچے دیکھا جا سکتا ہے۔ اس قسم کی جدید جانچ کچھ لیوکیمیا اور کم کثرت سے، کچھ سارکوما اور کارسنوماس کی درجہ بندی میں مدد کر سکتی ہے۔ یہ ٹیسٹ علاج کے بعد لیوکیمیا کینسر کے بقیہ خلیات کی چھوٹی تعداد کو تلاش کرنے کے لیے بھی کارآمد ہیں جو ایک خوردبین کے نیچے چھوٹ سکتے ہیں۔

مالیکیولر جینیاتی ٹیسٹ ڈی این اے کے بعض علاقوں میں تغیرات (غیر معمولی تبدیلیوں) کی بھی شناخت کر سکتے ہیں جو سیل کی نشوونما کو کنٹرول کرتے ہیں۔ ان میں سے کچھ تغیرات کینسر کے بڑھنے اور پھیلنے کا خاص طور پر امکان پیدا کر سکتے ہیں۔ بعض صورتوں میں، بعض تغیرات کی نشاندہی کرنے سے ڈاکٹروں کو ایسے علاج کا انتخاب کرنے میں مدد مل سکتی ہے جن کے کام کرنے کا زیادہ امکان ہو۔

بعض مادوں کو کہا جاتا ہے۔ اینٹیجن ریسیپٹرز مدافعتی نظام کے خلیوں کی سطح پر ہیں جنہیں لیمفوسائٹس کہتے ہیں۔ عام لمف نوڈ ٹشو میں بہت سے مختلف اینٹیجن ریسیپٹرز کے ساتھ لیمفوسائٹس ہوتے ہیں، جو جسم کو انفیکشن کا جواب دینے میں مدد کرتے ہیں۔ لیکن لیمفوما اور لیوکیمیا کی کچھ اقسام ایک ہی غیر معمولی لیمفوسائٹ سے شروع ہوتی ہیں۔ اس کا مطلب یہ ہے کہ ان تمام کینسر کے خلیوں میں ایک ہی اینٹیجن ریسیپٹر ہے۔ ہر خلیے کے ڈی این اے کے لیب ٹیسٹ اینٹیجن ریسیپٹر جینز ان کینسروں کی تشخیص اور درجہ بندی کرنے کا ایک انتہائی حساس طریقہ ہے۔

پولیمریز چین ری ایکشن (PCR): یہ مخصوص ڈی این اے کی ترتیب کو تلاش کرنے کے لیے ایک بہت ہی حساس مالیکیولر جینیاتی ٹیسٹ ہے، جیسے کہ کچھ کینسر میں پائے جانے والے۔ ریورس ٹرانسکرپٹیس PCR (یا RT-PCR) ایک طریقہ ہے جو بہت کم مقدار میں RNA کا پتہ لگانے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ آر این اے ڈی این اے سے متعلق ایک مادہ ہے جس کی ضرورت خلیوں کو پروٹین بنانے کے لیے ہوتی ہے۔ ہمارے جسم میں ہر پروٹین کے لیے مخصوص آر این اے ہوتے ہیں۔ RT-PCR کینسر کے خلیات کو تلاش کرنے اور درجہ بندی کرنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔

RT-PCR کا ایک فائدہ یہ ہے کہ یہ خون یا بافتوں کے نمونوں میں کینسر کے خلیات کی بہت کم تعداد کا پتہ لگا سکتا ہے جو دوسرے ٹیسٹوں سے چھوٹ جائیں گے۔ RT-PCR کو معمول کے مطابق مخصوص قسم کے لیوکیمیا سیلز کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے جو علاج کے بعد باقی رہتے ہیں، لیکن کینسر کی زیادہ عام اقسام کے لیے اس کی قدر کم یقینی ہے۔ نقصان یہ ہے کہ ڈاکٹروں کو ہمیشہ اس بات کا یقین نہیں ہوتا ہے کہ آیا خون کے دھارے میں کینسر کے چند خلیات یا لمف نوڈ ہونے کا مطلب یہ ہے کہ مریض درحقیقت دور میٹاسٹیسیس پیدا کرے گا جو علامات پیدا کرنے یا بقا کو متاثر کرنے کے لیے کافی بڑھے گا۔ کینسر کی سب سے عام اقسام کے مریضوں کے علاج میں، یہ ابھی تک واضح نہیں ہے کہ آیا اس ٹیسٹ کے ساتھ کینسر کے چند خلیوں کو تلاش کرنا علاج کے اختیارات کے انتخاب میں ایک عنصر ہونا چاہیے۔

RT-PCR کو کینسر کے خلیوں کی ذیلی درجہ بندی کے لیے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔ کچھ RT-PCR ٹیسٹ ایک ہی وقت میں ایک یا کئی RNAs کی سطح کی پیمائش کرتے ہیں۔ اہم RNAs کی سطحوں کا موازنہ کر کے، ڈاکٹر بعض اوقات یہ پیشین گوئی کر سکتے ہیں کہ آیا کینسر کے زیادہ یا کم جارحانہ ہونے کا امکان ہے (بڑھنے اور پھیلنے کا امکان) اس کی بنیاد پر کہ یہ خوردبین کے نیچے کیسا لگتا ہے۔ بعض اوقات یہ ٹیسٹ اس بات کا اندازہ لگانے میں مدد کر سکتے ہیں کہ آیا کینسر بعض علاجوں کا جواب دے گا۔

جین ایکسپریشن مائیکرو رے: یہ چھوٹے آلات کچھ طریقوں سے کمپیوٹر چپس کی طرح ہیں۔ اس ٹکنالوجی کا فائدہ یہ ہے کہ ایک ہی وقت میں سینکڑوں یا اس سے بھی ہزاروں مختلف RNAs کی نسبتاً سطحوں کا موازنہ کیا جا سکتا ہے۔ نتائج بتاتے ہیں کہ ٹیومر میں کون سے جین فعال ہیں۔ یہ معلومات بعض اوقات مریضوں کی تشخیص (آؤٹ لک) یا کچھ علاج کے جواب کی پیش گوئی کرنے میں مدد کر سکتی ہے۔

یہ ٹیسٹ بعض اوقات اس وقت استعمال کیا جاتا ہے جب کینسر جسم کے کئی حصوں میں پھیل چکا ہو لیکن ڈاکٹر اس بات کا یقین نہیں کر پاتے کہ یہ کہاں سے شروع ہوا ہے۔ (ان کو نامعلوم پرائمری کے کینسر کہا جاتا ہے۔) ان کینسروں کے آر این اے پیٹرن کا موازنہ کینسر کی معلوم اقسام کے نمونوں سے کیا جا سکتا ہے تاکہ یہ دیکھا جا سکے کہ آیا وہ مماثل ہیں۔ یہ جاننا کہ کینسر کہاں سے شروع ہوا علاج کے انتخاب میں مددگار ہے۔ یہ ٹیسٹ کینسر کی قسم کو کم کرنے میں مدد کر سکتے ہیں، لیکن وہ ہمیشہ یقین کے ساتھ کینسر کی صحیح قسم بتانے کے قابل نہیں ہوتے ہیں۔

ڈی این اے کی ترتیب: پچھلی دو دہائیوں سے، ڈی این اے کی ترتیب کا استعمال ایسے لوگوں کی شناخت کے لیے کیا جا رہا ہے جنہیں وراثت میں جینیاتی تغیرات ملے ہیں جو ان کے کینسر کی بعض اقسام کے ہونے کے خطرے کو بہت زیادہ بڑھا دیتے ہیں۔ اس معاملے میں، جانچ میں عام طور پر ان مریضوں کے خون کے خلیات سے ڈی این اے کا استعمال کیا جاتا ہے جن کو پہلے سے کچھ کینسر ہیں (جیسے چھاتی کا کینسر یا بڑی آنت کا کینسر) یا ان کے رشتہ داروں کے خون سے جن کو کوئی معلوم کینسر نہیں ہے لیکن ان کا خطرہ بڑھ سکتا ہے۔

ڈاکٹروں نے کچھ کینسروں کی ڈی این اے کی ترتیب کا استعمال شروع کر دیا ہے تاکہ یہ اندازہ لگایا جا سکے کہ کون سی ٹارگٹڈ دوائیں انفرادی مریضوں میں کام کر سکتی ہیں۔ اس پریکٹس کو بعض اوقات پرسنلائزڈ آنکولوجی یا پریزیشن آنکولوجی کہا جاتا ہے۔ سب سے پہلے، ڈی این اے کی ترتیب صرف ایک جین کے لیے کی گئی تھی یا چند جینوں کے لیے جو اکثر کینسر کی بعض اقسام کے لیے زیادہ متاثر ہوتے ہیں۔ حالیہ پیشرفت نے کینسر سے بہت زیادہ جینز یا حتیٰ کہ تمام جینز کو ترتیب دینا ممکن بنایا ہے (حالانکہ یہ اب بھی معمول کے مطابق نہیں کیا جاتا ہے)۔ اس ترتیب سے متعلق معلومات بعض اوقات جینوں میں غیر متوقع تغیرات کو ظاہر کرتی ہیں جو اکثر کم متاثر ہوتے ہیں اور ڈاکٹر کو ایسی دوا کا انتخاب کرنے میں مدد کر سکتے ہیں جس پر غور نہیں کیا جاتا اور ایسی دوسری دوائیوں سے پرہیز کرنا جن کے مددگار ہونے کا امکان نہیں ہے۔